論文名稱:牛樟芝子實體萃取物對於人類大腸癌細胞株 caco-2之細胞凋亡機制探討

論文名稱(外文):The apoptotic mechanism of Taiwanofungus camphoratus fruiting bodies’ extracts on human colon cancer caco-2 cell line
論文出版年:2011
研究生:吳佳燕
研究生(外文):Chia-Yen Wu
指導教授:吳宗正
指導教授(外文):Tzong-Zeng Wu
學位類別:碩士
校院名稱:國立東華大學
系所名稱:生命科學系
轉載 : 臺灣博碩士論文知識加值系統
語文別:中文



論文摘要:
本實驗中利用矽膠管柱層析法,
將牛樟芝子實體粗萃物依序由低極性至高極性逐步萃取,依極性遞減方式,分成FK1至FK6等六個劃分群,將各劃分群以不同劑量處理 caco-2 人類大腸癌細胞株,並利用細胞存活率測試篩選出最有效劃分為FK6。結果顯示FK6之IC50劑量為20 μg / mL。Caco-2細胞株經FK6以 IC50劑量處理後,細胞週期中subG1期於24小時增加7.3%、48小時增加8.9%。接著以annexinV - FITC&;PI雙染,結果顯示隨著加入FK6 濃度或時間增加,偵測到活著的細胞數量下降,壞死及凋亡的細胞數量上升。最後利用Western blot偵測凋亡蛋白表現,證實 caco-2 細胞株受到刺激後,在extrinsic apoptosis部分,FasL表現量增加,活化死亡受體Fas receptor;接著活化細胞質內caspase 8,促使Bid活化成tBid,造成粒線體中Bax表現量上升與Bcl-2表現量下降,而誘導粒線體中cytochrome c 釋出,充分顯示出intrinsic apoptosis中粒腺體訊息傳遞路徑,cytochrome c 由粒腺體釋出後,會活化caspase 9,接著活化下游caspase 3,再進一步活化caspase 7並抑制PARP 表現,使細胞喪失DNA修復能力,促使細胞走向凋亡。本論文證實牛樟芝子實體萃取物中的FK6 成分,能夠抑制 caco-2 癌細胞的生長,並誘導細胞引發Fas / FasL 下游一連串凋亡訊息產生,細胞因而進行凋亡反應。基於本論文所顯示的成果,牛樟芝子實體中 FK6 成分,應有機會進一步成發展成治療大腸癌之有效藥物。